介紹了723型可見分光光度計(jì)的整機(jī)結(jié)構(gòu)、工作原理和單色光的光學(xué)系統(tǒng),重點(diǎn)分析了單色的產(chǎn)生機(jī)制以及波長(zhǎng)定位和驅(qū)動(dòng)。并給出了實(shí)現(xiàn)產(chǎn)生320nm~820nm,波長(zhǎng)可讀精度為0.1nm的單色光的方法。
分光光度計(jì)是產(chǎn)生和利用單色光照射樣品 ,并測(cè)量單色光透過(guò)透明樣品前、后的入射光及透射光能量的儀器。世界上的分析工作量有20 %~30%是用分光光度計(jì)完成的。其在質(zhì)控、農(nóng)業(yè)、醫(yī)療衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)控、化學(xué)分析等部門得到了廣泛的應(yīng)用。我國(guó)早在七、八十年代就開發(fā)出了第三代分光光度計(jì)。這些產(chǎn)品經(jīng)十余年、十余萬(wàn)臺(tái)長(zhǎng)期生產(chǎn)和應(yīng)用 ,成熟度已經(jīng)很高。使用現(xiàn)代的電子技術(shù)和單片微機(jī)對(duì)這些產(chǎn)品進(jìn)行二次開發(fā) ,可以縮短產(chǎn)品開發(fā)周期和上市時(shí)間。作者是在上海精密科學(xué)儀器公司生產(chǎn)的 723型可見分光光度計(jì)基礎(chǔ)上進(jìn)行了儀器的二次開發(fā) ,應(yīng)用在對(duì)蛋白酶濃度的測(cè)量。
723型可見分光光度計(jì)單色器的波長(zhǎng)定位和驅(qū)動(dòng):723型可見分光光度計(jì)的單色器可產(chǎn)生從320nm到 820nm的單色光,在 723型可見分光光度計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)中 ,經(jīng)反射鏡鏡像變換后,入射狹縫與出射狹縫靠得很近,可以認(rèn)為入射角與衍射角相等,而且723型可見分光光度計(jì)使用的是+ 1級(jí)光,因此723型可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)可讀精度是0.1nm。723型可見分光光度計(jì)是以尋找零級(jí)光作為波長(zhǎng)定位的基點(diǎn)。在復(fù)合光的衍射光譜上,各單色光的零級(jí)光重疊在一起,零級(jí)光的中心部分能量最高 ,而且比±1級(jí)光的能量高好幾倍。根據(jù)這一點(diǎn),原則上只要找到能量的最高點(diǎn)即找到了零級(jí)光的中心。723型可見分光光度計(jì)在設(shè)計(jì)上方便了零級(jí)光的查找,為了精確定位,在單色器內(nèi)設(shè)置了一光電續(xù)斷器裝置 ,當(dāng)儀器步進(jìn)電機(jī)帶動(dòng)光柵逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)返回波長(zhǎng)起點(diǎn),齒輪上的遮光片切斷光電耦合器電路,光電耦合器輸出低電頻 ,通過(guò)8155I/0PB7口送8031芯片控制。而零級(jí)光的中心就在這個(gè)機(jī)械卡位的右面附近。接著,步進(jìn)電機(jī)帶動(dòng)光柵右轉(zhuǎn)一步,查詢一步,找到能量最高點(diǎn)就找到了零級(jí)光的中心。以后這個(gè)位置就作為整個(gè)波長(zhǎng)定位的基準(zhǔn)點(diǎn)。
本實(shí)驗(yàn)室與中科院上海分院的生物研究所合作,在上海精密科學(xué)儀器公司生產(chǎn)的723型可見分光光度計(jì)的基礎(chǔ)上,增加了樣品室的溫控功能和吸液裝置 ,成功地應(yīng)用在了蛋白酶濃度的測(cè)量,在臨床診斷上發(fā)揮了作用。
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